工程化DC细胞免疫治疗技术

拉霸LaBa360生物工程化DC细胞技术实现人原代DC细胞在GMP标准实验室的规模化扩增和培养

为了克服常规DC细胞制备方法的技术难点，拉霸LaBa360生物开发了一种新型的工程化DC细胞技术 (eDC 细胞技术)，使体外培养人原代DC细胞不再是个难题。

eDC细胞来源均一，批次间稳定性好，个体间或供者间的质量差异小。 DC细胞株易于培养，均一性稳定性好，质量控制和产品制备可实现标准化；同时， eDC 细胞可进行多重基因修饰或基因编辑对DC实施工程化改造，强化DC细胞癌症治疗性疫苗的功效。

该技术本质上解决了DC细胞的高质量扩增制备、高效抗原负载、规模化制备的问题，使DC细胞癌症疫苗同时具备安全性、有效性、精准性。

工程化DC细胞技术具备多项优势

拉霸LaBa360生物的工程化DC细胞技术，可使用基因工程技术大规模体外培养扩增人原代DC细胞。此外，拉霸LaBa360从PBMC细胞中培养扩增得到纯的cDC细胞亚群具备以下特点：
(1) 该方法技术成熟，可由人体的外周血原代DC细胞，建立稳定的DC细胞系。
(2) 这些DC细胞维持稳定的免疫表型以及抗原递呈功能。
(3) eDC细胞既可诱导幼稚型T细胞分化为抗原特异性T细胞, 又可扩增记忆性抗原特异性T细胞以及肿瘤浸润性T细胞。
(4) eDC细胞的肿瘤抗原负载能力强。肿瘤抗原通过cDNA形式实现在细胞内稳定表达, 也可采用AAV或者mRNA转导技术导入抗原。
(5) 对于能够在体外培养生长的eDC细胞，可通过基因修饰或者基因编辑的方式进一步增强该细胞的功能。例如导入靶向癌组织的细胞表面分子，CAR等。
(6) 由于eDC细胞高表达趋化因子受体 CCR7，因此其回流到淋巴组织的能力提高。eDC细胞与淋巴组织内富集的免疫细胞相互作用后，可最大限度地刺激机体抗肿瘤免疫反应。
(7) DC细胞资源库可提供自体的DC细胞或供体来源的DC细胞，配合大数据分析，用于支持基础和临床研究。

eDC细胞可规模化标准化生产

常规DC细胞制备方法需要采集大量外周血或者使用侵入式的单采方式，进而获取单核细胞衍生的DC (MoDC)。由于细胞多来源于晩期患者，细胞数量和质量难以保证，其细胞制备的均一性和稳定性差。MoDC 贴壁培养的特点， 也给工艺流程带来挑战。此外，MoDC细胞常表达低水平CCR7，以及低水平CD83，并不是理想的用于免疫治疗的免疫表型。

eDC细胞表达高水平活化分子包括CCR7和CD83等，显示适于免疫治疗的免疫表型。另外，作为可持续培养的DC细胞系，均一性好，稳定性优异，其可悬浮培养的特点更为工艺流程，标准化规模化生产带来极大的便利。

eDC细胞的免疫表型

eDC细胞具有高度成熟和活化的免疫表型
首先，其谱系阴性(CD3-/CD14-/CD19-/CD56-) 即可排除它们是T细胞，单核细胞，B细胞和NK细胞. 其次, DC活化相关的分子如CD80, CD86, CD70, HLA-DR, CCR7 在持续培养的eDC细胞中稳定表达，无需任何刺激。再者, 这些eDC细胞保持着驯导初始T细胞分化成抗原特异性细胞毒性T细胞的能力。

eDC细胞高水平表达CCR7，显示可高效靶向淋巴结
 CCR7是一种趋化因子受体, CD83是DC细胞成熟度的标记，其在eDC细胞高水平表达，显示高成熟度高活性的特征，激活免疫效应细胞, 更为优势展示免疫治疗功效。

eDC细胞免疫治疗技术的建立，可规模化获取高质量cDC亚群
eDC细胞表达cDC亚型的特殊标志，如XCR1，IRF8，BATF3，拥有卓越的抗原交叉递呈能力，主要诱导以CD8 T细胞免疫反应，同时具备激活NK细胞能力。这些eDC细胞是功能最为强大的DC细胞。

工程化DC细胞技术对比常规DC方法具备多种优势